冬虫夏草提取物药理作用及活性成分研究
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冬虫夏草提取物药理作用及活性成分研究
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冬虫夏草,为麦角菌科水苏属植物,是冬虫夏草菌寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座与幼虫尸体的干燥复合体。其气微腥、味微苦,性甘、平,归肺、肾经,具有益肺补肾和化痰止血的功效。
1723年,一位欧洲传教士把从中国西北地区高山草地上采到的一种奇怪的生物带到了法国,这种生物看上去既像动物又像植物。著名学者勒内·安托万在法国科学院学术大会上把它向大家作了介绍。一时间,这种奇异的生物引起了公众的注意,那就是冬虫夏草。现在我们知道,所谓冬虫夏草是一种叫虫草菌的菌类植物寄生在虫体内形成的结合体。当菌类植物的子囊孢子寄生到虫草蝙蝠蛾的幼虫体内后,便开始悄悄地吸取幼虫体内的营养。天冷了,幼虫为了过冬,在秋天时节便钻入土中。此时,这是一条货真价实的虫子。从外表看,它与其他幼虫没什么两样。当真菌的子囊孢子在虫体内形成菌丝体后,便加快了吸收营养的步伐。虫体内的菌丝不断形成坚硬的菌核。到了第二年夏天,菌核便从虫体头部长出一根棒状的“草”,棒状结构上部膨大,表面长出许多小球体,球体内部隐藏着子囊孢子。子囊孢子被释放出来以后,又继续侵染虫草蝙蝠蛾的幼虫,来年又长出“草”,冬虫夏草就这样不断繁衍生息。冬虫夏草生活在我国四川、西藏、云南、贵州、青海、甘肃等地海拔3600~4500米的山地阴坡、半阴坡灌木丛和草地中。那里土壤肥沃,水分适当,为其提供了良好的生长条件。冬虫夏草作为名贵药材有强壮滋补的作用,能益肺、益肾、止血、化痰。它含蛋白质、氨基酸、甾醇、甘露醇、生物碱、多糖及矿物质等多种成分,而其中的重要成分是虫草酸。
冬虫夏草提取物
冬虫夏草具有生物活性的提取物,往往成分比较复杂,难以确认是单一组分还是多组分协同作用的体系,尚未从分子层面阐释其产生生物活性的机理。冬虫夏草提取物的制备方法多种多样,不同条件下制取的提取物成分、含量均有差异。不同组分的提取物,可能体现出不同的生物活性。
传统的冬虫夏草药材,是以其干品入药,如《中国药典》对其描述为“晒至六七成干,除去似纤维状的附着物及杂质,晒干或低温干燥”。而不同的干燥方式对冬虫夏草活性成分含量有影响。
在制备冬虫夏草提取物时,最常用的方式是浸取。为了提高浸取效率,可以采用一些辅助手段,如热回流、超声等。通过实验对比常见重金属元素、指纹图谱、部分主要/差异性成分,发现含超声方式所制得的提取液稳定性和均一性均较好、提取到的生物活性化合物种类更多。值得注意的是,较高的温度可能导致某些热敏性物质损失。
制备冬虫夏草提取物最常用的溶剂是水。在使用水进行提取时,不同的PH值条件仍然可能导致有差异的提取结果。除了单独使用水作为溶媒,还可以使用水-有机溶剂混合溶媒对冬虫夏草进行提取。此外,部分有机溶剂也可用来制备冬虫夏草提取物,如使用乙醇作为溶媒可以得到总酚和总黄酮类小分子成分含量较高的提取物。
冬虫夏草提取物药理作用
1、对心血管系统的保护作用
冬虫夏草水提液可使心率减慢,心输出量和冠脉流量增加;虫草及虫草菌水提液腹腔注射,均可延长注射异丙肾上腺素后常压缺氧小鼠的存活时间;虫草菌醇提取物皮下注射,可增加小鼠心肌86Rb的摄入量,增加心肌供血;人工虫草菌菌丝体醇提物和发酵液对甲状腺素和去甲肾上腺素所引起的大鼠应激性心肌梗塞也有一定的保护作用;连续给小鼠口服虫草粉或虫草菌粉或皮下注射虫草菌醇提取物,均可明显降低血清胆固醇含量及血浆β-脂蛋白;虫草菌醇提液静脉注射,可明显延长乌头碱所诱发大鼠心律失常的潜伏期,缩短心律失常持续时间,并减少心律失常的程度。
2、免疫增强作用
冬虫夏草醇提物或水煎给小鼠皮下或腹腔注射或肌注,均能显著增强单核-巨噬细胞系统的吞噬功能,巨噬细胞体积及胞核增大,胞浆丰富,胞浆内颗粒、空泡、吞噬小体、溶酶体增加,血清中溶菌酶含量增加。又能拮抗考的松对巨噬细胞吞噬功能的抑制作用。用虫草给家兔灌服能促进淋巴细胞转化,给小鼠腹腔注射使T细胞酸性酯酶活性增强,脾重及脾中核酸、蛋白质含量增加,脾中T细胞E-玫瑰花结形成率增加;又能拮抗强的松龙、环磷酰胺引起的脾重下降及E-玫瑰花结形成减少。虫草或虫草菌还能使正常、阳虚、阴虚小鼠血清免疫球蛋白G增加。
3、对内分泌的影响
冬虫夏草及虫草菌水提液可使去势幼年雄性大鼠精囊增加,显示有雄激素样作用;虫草及虫草菌水提液给Chemicalbook雄性小鼠灌胃,可使小鼠血浆皮质醇含量增高;还可增高肾上腺胆固醇含量,使肾上腺增重;虫草具有雄激素样的作用,对醋酸氢化可的松所致“类阳虚”小鼠有防治作用。
4、对肾功能的影响
临床上把人工虫草菌的制剂用于慢性肾炎患者,结果表明可降低肾炎蛋白尿,提高血清锌含量,降低铜/锌比值,使血尿明显好转。
5、抗肿瘤作用
冬虫夏草水、醇提取物均可抑制小鼠S180肉瘤、小鼠Lewis肺癌、小鼠mA-737乳腺癌等肿瘤生长;菌丝对小鼠S180、S37、EcA及P388均有显著抑制作用;虫草及虫草菌水提物不仅可抑制小鼠S180肿瘤生长,同时还能增强环磷酰胺的抗癌作用。
6、对呼吸系统的作用
冬虫夏草水提取液具有显著增强肾上腺素的分泌、松弛支气管平滑肌、扩张支气管、祛痰、平喘等功效,对劳咳痰血、肺结核及慢性支气管炎等疾病具有良好的治疗效果。
冬虫夏草提取物活性成分
对冬虫夏草及其提取物的诸多研究表明,冬虫夏草中含有大量具有生物活性的物质,在使用提取物时,受药材本身质量、提取工艺参数控制等因素影响,提取物质量可能有所差异。此外,由于冬虫夏草来源有限,大规模可持续的提取物生产受到限制。因此,进一步对冬虫夏草提取物进行分离纯化,确定其中的活性成分十分必要。
1、肽类物质
以冬虫夏草干燥的子实体为原料,分离纯化得到虫草多肽,并使用糖尿病骨质疏松大鼠模型对其治疗骨质疏松的效果进行评价。结果表明,该虫草多肽可以缓解相关症状,防止骨质流失,降低体内氧化剂活性,抑制骨吸收相关标志物的表达。
2、虫草多糖
多糖具有多种生理活性,虫草多糖是冬虫夏草中极其重要的成分。以鲜冬虫夏草为原料,经脱脂、提取、沉淀、脱蛋白和透析获得虫草粗多糖,活性测试发现其可显著促进RAW246.7巨噬细胞增殖和释放NO、TNF-α,具有良好的免疫调节作用。
3、活性蛋白组分
通过实验采用液氮研磨冷提法对冬虫夏草蛋白组分进行提取,并进一步进行了蛋白分离。在体外细胞免疫活性测定结果中,发现冬虫夏草蛋白组分对巨噬细胞分泌TNF-α、IL-1、IL-12因子整体呈双向调节作用,认为具有双向调节的免疫作用。
结论
随着研究的不断深入,冬虫夏草的潜力被不断挖掘。目前,研究者已经发现各种冬虫夏草提取物的诸多药理作用及生理活性。但大部分提取物成分仍比较复杂,受到药材本身质量及提取工艺的影响,提取物的质量及活性要保持均一、稳定有一定难度。因此,提取物的原料质量标准、提取生产工艺和质量控制方法均需要进行科学的试验和严谨的论证。
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